逆流色谱

任何一种分离方法都是基于混合物中被分离组分的某种物理性质的不同而实现的。液液萃取避免了样品的不可 逆吸附、失活和变性等问题。逆流色谱仪是一种多功能性的仪器，它可以进行一些其他与色谱无关的分离过程，比 如逆流泡沫浮选、逆流萃取等。

1．逆流分溶法源于 20 世纪 50 年代多极萃取技术（非连续性），多极萃取设备庞大复杂、易碎、溶剂体系容易乳 化，溶剂耗量大，分离时间长。后被离心分离色谱和螺旋管式逆流色谱逐渐取代。

2．离心分离色谱和螺旋管式逆流色谱

离心分离色谱和螺旋管式逆流色谱利用了离心力场来实现固定相的保留。建立在离心力场作用基础上的逆流色 谱分 2 种，一种被称为流体静力学平衡体系，另一种称为流体动力学平衡体系。建立在流体静力学平衡体系的 逆流色谱仪，被称为离心分配色谱仪或 CPC；建立在流体动力学平衡体系的逆流色谱仪被称为 J 型逆流色谱仪 或者 CCC。

按照分离柱的旋转方式可以分为 J 型逆流色谱仪、正交轴逆流色谱仪、非同步逆流色谱仪、离心分离色谱仪； 按照旋转速度可分为高速逆流色谱仪和低速逆流色谱仪。其中不同的逆流色谱仪可以放置同一类型或者不同类型的 多个分离柱。

逆流色谱是一种特殊的液相色谱技术，它利用特殊的色谱柱实现了液态固定相的有效保留，其遵循基本的色谱 塔板数理论和经典的色谱公式。逆流色谱是利用在离心力场的作用下实现固定相的保留而完成萃取。其中 CPC 是 通过离心式旋转的分离柱而实现；J 型逆流通过分离柱进行行星式旋转而实现，其萃取原理如下：

具有样品无损失、无污染、高效、快速和大制备量分离等优点，被广泛应用于中药成份分离、保健食品生物 化学、生物工程、天然产物化学、有机合成、环境分析等领域。

由于溶剂系统的组合是多样的，因而从理论上讲可以适用于任何极性范围内样品的分离，同时在分离天然化合 物方面具有其独到之处。

操作简单 仪器操作简单，对样品的预处理要求低，一般的粗提物即可进行制备分离或分析。

回收率高 不需要固相载体，消除了由于样品在固相载体上的不可逆吸附和降解造成的损失，理论上样品的回收率可达 100%, 在实验中只要调整好分离条件，一般都有很高的回收率。

重现性好 如果样品不具有较强的表面活性作用，酸碱性也不强，即使多次进样，其分离过程都保持很稳定，而且重现性相当 好。

分离效率高，分离量较大 由于其与一般的色谱分离方式不同，能实现梯度洗脱和反相洗脱，亦能进行重复进样，使其特别适用于制备性分离， 产品纯度高，制备量大。